Horatio "H" Caine (David Caruso) หัวหน้าแล็บอาชญากรรมของ ไมอามี่ เด็ค และหัวหน้าทีม CSI ของซีรีส์นี้ ก่อนหน้านี้เคยเป็น เจ้าหน้าที่แผนกสอบสวน ที่กรมตำรวจนิวยอร์ก ก่อนจะย้ายมาเป็นเจ้าหน้าที่เก็บกู้วัตถุระเบิดของกรมตำรวจไมอามี่ เด็ค และได้เลื่อนขั้นจนมาเป็นหัวหน้าแล็บอาชญากรรมของ ไมอามี่ เด็ค เป็นคนที่มีบุคลิกสุขุมนุ่มลึกและใจเย็น เขามักจะใช้ความเงียบเพื่อนิ่งคิด พิจารณา มากกว่าที่จะพูด เอาจริงเอาจังกับงาน มักตาต่อตา ฟันต่อฟันกับคนร้าย และไม่เกรงกลัวต่ออิทธิพลหรือคำขู่ใดๆ ทั้งสิ้น มีบ่อยครั้งที่เรามักเห็นว่า ในความเงียบขรึมของเขา กลับแฝงไว้ด้วยความใจร้อน เขามักจะไม่ค่อยเข้าแล็บเอง แต่ถ้าเป็นคดีสำคัญเขามักจะเข้าแล็บเพื่อจัดการกับหลักฐานทุกอย่างด้วยตัว เขาเอง ลูกน้องในทีมทุกคนต่างก็เชื่อมั่นในตัวเขาและนับถือเขามาก
Det. Calleigh Duquesne (Emily Procter) หญิงสาวสวย ที่เชี่ยวชาญเรื่อง กระสุนปืนและอาวุธปืน ไม่เป็นที่สองรองใคร ที่มากด้วยความสามารถ ฉายาของเธอ คือ "Bullet Girl" ความสวยหวานและความบอบบางของเธอขัดแย้งกับความเป็นจริงที่ว่า แท้ที่จริงแล้วเธอไม่เพียงแค่สวยเพียงอย่างเดียว แต่เธอทั้งเก่งและมีความสามารถรอบตัว
Doctor Alexx Woods (Khandi Alexander) เป็นผู้รอบรู้ประจำทีม CSI ที่โฮราชิโอ้เชื่อมั่นในฝีมือมากๆ เธอเริ่มงานด้านการแพทย์ครั้งแรกเป็นนักฟิสิกส์ ในนิวยอร์ก และเป็นเจ้าหน้าที่นิติวิทยากับทีม CSI หลังจากที่เธอย้ายมายัง ไมอามี่ ด้วยลักษณะนิสัยและเหตุผลส่วนตัวของโฮราชิโอ้เธอจึงถูกเลือกเข้ามา เป็นคนถืออารมณ์ของตัวเองเป็นส่วนใหญ่และมีความเป็นห่วงและกังวลอย่างมาก เวลามีใครบางคนในทีมได้รับบาดเจ็บ (เห็นได้จากการถามอาการของ ไรอัน หลังเกิดเหตุที่ถูกปืนยิงตะปูเข้าที่ตาว่าเป็นอย่างไรบ้าง) เธอเป็นหมอชันสูตรศพที่ทำงานได้เชี่ยวชาญอย่างเหลือเชื่อ ทุกศพที่ผ่านมือเธอจะถูกถ่ายทอดออกมาอย่างชำนิชำนาญและในเวลาที่เธอทำงาน ก็มักจะพูดคุยกับศพด้วยน้ำเสียงที่อ่อนโยนและห่วงใย
Timothy "Tim Speed" Speedle (Rory Cochrane) ชายหนุ่มมาดดี ที่ถนัดในการลุยจนถึงที่เกิดเหตุ และสามารถค้นหาหลักฐานที่เกิดเหตุได้เสมอ เป็นคนช่างสังเกตและเชี่ยวชาญในเรื่องการแยกวัตถุต่างๆ ที่จะใช้ประกอบเป็นหลักฐานได้
Det. Eric Delko (Adam Rodriguez) ชายหนุ่ม ที่เชี่ยวชาญเรื่องการ ค้นหาร่องรอยลายนิ้วมือและสืบค้นข้อมูลยาเสพย์ติด และเป็นผู้เชี่ยวชาญการประดาน้ำลึกในการหาหลักฐาน เขาเสมือนเป็นมือใหม่ของทีม ที่พร้อมจะทำงานได้ทุกที่ ทุกสถานการณ์ ไม่ว่าหัวหน้าทีมสั่งการอะไร เขาจะเต็มใจทำโดยทันที
Megan Donner (Kim Delaney) อดีตหัวหน้าแล็บอาชญากรรมของ ไมอามี่ เด็ค ก่อนหน้าโฮราชิโอ้และลาออกไปจากงานที่เธอทำโดยไม่มีกำหนด อันเนื่องมาจากออกไปค้นหาการเสียชีวิตของสามีเธอ เธอกลับมาร่วมงานชั่วคราวคู่กับโฮราชิโอ้ ตามคำขอร้องของโฮราชิโอ้
เรื่อง ย่อ
ในปี 2543 CSI ก้าวขึ้นสู่ตำแหน่งสุดยอดซีรี่ส์ที่ได้รับความนิยมจากผู้ชมสูงสุดเป็น ประวัติการณ์! ทำลายทุกเรทติ้งของซีรี่ส์ฮิตทุกเรื่องในอเมริกา ด้วยการพลิกโฉมรูปแบบการนำเสนอใหม่ๆ อย่างเฉียบคม โดยโฟกัสที่การไขที่มาของคดีปริศนาตลอดจนวิธีการสืบหาเบาะแสอย่างมีเหตุและ ผลที่ไม่ยากที่ผู้ชมจะเข้าใจได้ จนนำพาผู้ชมไปสู่จุดไคลแม็กซ์ของแต่ละตอนด้วยความทึ่งในกลวีการคิดและลุ้น ระทึกไปกับทีม CSI แห่งเมืองไมอามี่ ที่เฉลียวฉลาด และมีเสน่ห์เฉพาะตัวแต่ละคน ไม่แพ้ทีม CSI : Las Vegas | 
